Pipetten sind Laborgeräte, die zum Messen und Übertragen von sehr kleinen Flüssigkeitsmengen verwendet werden. Genauigkeit bei Pipettenmessungen ist sehr wichtig, da Unterschiede im von der Pipette fallenden Volumen die experimentellen Ergebnisse beeinflussen können. Um die Genauigkeit zu gewährleisten, ist es wichtig, die Pipettenkalibrierung alle paar Monate zu überprüfen. Der Kalibriervorgang ist nützlich, um zu überprüfen, ob dieses Gerät Flüssigkeit in der richtigen Menge tropft, damit bei Bedarf Reparaturen durchgeführt werden können.
Schritt
Teil 1 von 2: Kalibrierung überprüfen
Schritt 1. Sammeln Sie die notwendigen Materialien
Um die Kalibrierung der Pipette zu überprüfen, werden eine Pipette, Pipettenspitzen, destilliertes Wasser, Becher, Thermometer, Waage und Wägebecher benötigt. Die verwendete Waage muss eine Mikrogramm-Skala aufweisen, um die Mikropipette mit einem Höchstwert von 1 L zu kalibrieren.
- Sie benötigen nicht mehr als 5 ml Wasser. Füllen Sie den Becher mit Wasser.
- Stellen Sie sicher, dass die Pipettenspitze richtig ist und fest in der Pipette sitzt.
Schritt 2. Messen Sie die Temperatur des destillierten Wassers
Legen Sie das Thermometer in das Wasser und lassen Sie es mindestens eine Minute stehen. Wenn sich die rote Linie des Thermometers noch bewegt, warten Sie noch eine Minute. Notieren Sie nach einer Minute die Temperatur. Nimm das Thermometer und trockne es, wenn du fertig bist.
Es ist wichtig, die Temperatur des Wassers zu kennen, da sie für Berechnungen verwendet wird, die zur Überprüfung der Kalibrierung durchgeführt werden
Schritt 3. Stellen Sie den Wägebecher auf die Waage und stellen Sie die Waage auf Null
Idealerweise verfügt die verwendete Waage über eine Tür und einen isolierten Innenraum. Stellen Sie den Wägebecher in die Waagenkammer und schließen Sie die Tür. Wenn Ihre Waage keine Kabine und keine Tür hat, stellen Sie einfach einen Wägebecher auf die Waage. Drücken Sie die Taste „Zero“oder „Tare“und warten Sie, bis die Waage Null anzeigt.
Durch das Nullstellen der Waage wird das Gewicht des Plastikbechers reduziert und Sie können nur das Gewicht der in den Becher gefüllten Substanz wiegen
Schritt 4. Bereiten Sie die Pipette für die Kalibrierung vor
Wischen Sie die Pipette vor dem Start mit Ethanol ab und vergewissern Sie sich, dass nichts die Pipettenspitze verstopft. Stecken Sie die richtige Pipettenspitze auf die Pipettenspitze und bestimmen Sie das zu testende Volumen.
Testen Sie zur Kalibrierung das kleinste und größte Volumen, das aus der Pipette entnommen werden kann
Schritt 5. Waschen Sie die Pipettenspitze, bevor Sie sie kalibrieren
Drücken Sie die Taste bis zum ersten Anschlag und tauchen Sie die Pipettenspitze ca. 2 mm tief in das destillierte Wasser. Lassen Sie die Taste los, um einen Teil der Flüssigkeit aufzunehmen, und geben Sie die Flüssigkeit dann wieder ab, indem Sie die Taste drücken. Wiederholen Sie diesen Schritt dreimal, um die Tropferspitzen vor dem Gebrauch zu waschen.
Drücken Sie die Taste bis zum zweiten Anschlag, um die restliche Flüssigkeit von der Pipettenspitze zu entfernen, und nehmen Sie dann die Pipette aus dem Wasser
Schritt 6. Saugen Sie das Kalibriervolumen auf
Drücken Sie die Pipettenspitze außerhalb des destillierten Wassers und drücken Sie die Taste bis zum ersten Grenzwert. Tauchen Sie die Pipettenspitze 2 mm tief in das destillierte Wasser und lassen Sie den Knopf los, um die Flüssigkeit in die Pipettenspitze zu saugen. Warten Sie etwa 1 Sekunde, bevor Sie die Tropferspitze aus dem Wasser nehmen.
Stellen Sie sicher, dass die Pipettenspitze während des Aspirationsvorgangs vollständig eingetaucht ist. Es dürfen keine Blasen in der Tropferspitze sein, sonst kann das Ergebnis falsch sein
Schritt 7. Gießen Sie die Flüssigkeit in die Wägeschale der Waage
Setzen Sie die Pipettenspitze auf den Boden des Wägebechers und drücken Sie dann die Pipettentaste bis zum ersten Grenzwert. Bewegen Sie sich zu einem anderen Punkt, der etwas vom Wasser entfernt ist, und drücken Sie dann die Taste bis zum zweiten Grenzwert. Halten Sie die Taste gedrückt und heben Sie die Pipettenspitze vom Wägebecher ab.
Lassen Sie die Spitze an der Pipette befestigt, da Sie sie für einige andere Kalibrierungstests wieder verwenden werden
Schritt 8. Notieren Sie das auf der Waage angezeigte Gewicht
Schließen Sie die Tür der Waagenkabine, wenn Sie eine Türwaage verwenden. Warten Sie, bis sich die Zahlen nicht mehr ändern. Schreibe in dein Heft.
Es ist wichtig zu warten, bis sich die Zahlen auf der Skala nicht mehr ändern, bevor Sie sie aufschreiben. Notizen gehen schief, wenn Sie nicht warten
Schritt 9. Wiederholen Sie diesen Vorgang, um die Messung mindestens 10 Mal durchzuführen
Stellen Sie die Waage wieder auf Null, waschen Sie die Pipettenspitzen vor Gebrauch, saugen Sie die gleiche Flüssigkeitsmenge auf, entnehmen Sie das Volumen und notieren Sie dann das Gewicht. Notieren Sie das Gewicht des destillierten Wassers für das gleiche Volumen und mitteln Sie dann alle Ihre Notizen.
Sie können diesen Vorgang für verschiedene Volumes wiederholen, wenn jedes Volume mehrmals getestet wird
Teil 2 von 2: Berechnung des Kalibrierergebnisses
Schritt 1. Definieren Sie die Formel für das berechnete Volumen
Die Formel zur Berechnung des von der Pipette ausgestoßenen Flüssigkeitsvolumens lautet V = w * Z, w ist das Gewicht des Wassers, Z ist der Umrechnungsfaktor basierend auf der Dichte des Wassers, während V das Volumen der Wassermenge ist ENTFERNT.
- Die Variable Z kann durch Berechnung der Dichte von Wasser unter Verwendung der zu Beginn des Experiments aufgezeichneten Temperatur erhalten werden.
- Beispiel: Bei einer Wassertemperatur von 23°C beträgt der Z-Wert 1,0035 g/mg.
Schritt 2. Berechnen Sie den Gesamtdurchschnitt der Pipettenkalibrierungen
Die von der Pipette abgegebene Wassermenge wurde mindestens zehnmal gewogen. Um den Durchschnitt aller dieser Werte zu erhalten, addieren Sie sie alle zusammen und teilen Sie sie durch 10. Wenn Sie mehr oder weniger des Prozesses durchgeführt haben, addieren Sie die Gesamtergebnisse und dividieren Sie dann durch die Anzahl der durchgeführten Versuche.
- Beispiel: Das Wassergewicht aus den 10 Experimenten, die Sie mit der 10-µL-Pipette durchgeführt haben, ist wie folgt: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 und 9, 98.
- Der Mittelwert ist: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9.984
Schritt 3. Setze die Variablen in die Gleichung ein und löse
Sobald Sie die richtige Zahl für jede Variable ermittelt haben, setzen Sie sie in die Formel ein und vervollständigen Sie das berechnete Volumen. Um diese Gleichung zu lösen, multiplizieren Sie einfach das durchschnittliche Gewicht aller Versuche mit dem Z-Wert.
Zum Beispiel: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10, 019
Schritt 4. Berechnen Sie die Genauigkeit der Pipette
Verwenden Sie die Gleichung A = 100 x Vdurchschnittlich/V0 um die Pipettengenauigkeit zu berechnen. A zeigt Pipettengenauigkeit an, Vdurchschnittlich das berechnete mittlere Volumen ist und V0 ist der an der Pipette eingestellte Wert. Der Genauigkeitswert sollte zwischen 99-101% liegen.
- Wenn die Pipette richtig kalibriert ist, sollte der berechnete Wert dem tatsächlichen Wert der Pipette sehr nahe kommen.
- Zum Beispiel: A = 100 x Vdurchschnittlich/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19 %
- Diese Pipette ist richtig kalibriert.
Schritt 5. Senden Sie die Pipette ggf. zur Kalibrierung
Wenn Ihre Pipette den Kalibrierungstest nicht besteht, verwenden Sie sie jetzt nicht für Experimente. Pipetten sind sehr zerbrechliche und teure Laborgeräte. Sie können die Kalibrierung nicht selbst beheben, die Pipette muss zur Reparatur eingeschickt werden. Alternativ kommen mehrere Firmen in Ihr Labor und kalibrieren die Pipette vor Ort.
